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DNA測序技術(shù)簡介
2016/7/1 13:44:44 瀏覽量(1984)經(jīng)過幾十年的發(fā)展,DNA 測序技術(shù)取得了令人矚目的成就,主要可以劃分為三代測序技術(shù)。1977年,Sanger等提出雙脫氧鏈末端終止法的DNA測序技術(shù),又稱Sanger法測序 。作為第一代測序技術(shù),這種方法依賴放射性同位素標(biāo)記來實現(xiàn),操作繁瑣,未能實現(xiàn)自動化,不能夠滿足大規(guī)模測序的要求。20世紀(jì)80年代末,熒光標(biāo)記逐漸取代同位素標(biāo)記,可以通過分析熒光信號來確定DNA序列。由于該類測序法仍然依賴凝膠電泳分離技術(shù),其分析速率、并行化程度以及測序成本很難進一步改善。與Sanger測序法相比,第二代測序技術(shù)不需要電泳設(shè)備,操作簡便,成本低廉,集成化、自動化程度高,能夠?qū)崿F(xiàn)高通量測序,為以后大規(guī)模平行測序的平臺奠定了技術(shù)基礎(chǔ)。目前已取得了廣泛的應(yīng)用,但由于其測序過程是基于PCR擴增技術(shù),在讀長、成本和準(zhǔn)確性等方面也不夠理想。第三代測序技術(shù)在測序讀長這一方面在很大程度上優(yōu)于第二代測序技術(shù),而且還具有高通量、低成本、耗時短等優(yōu)點,但其技術(shù)缺陷是會出現(xiàn)插入和缺失錯誤,并行化的問題也有待解決。目前,第三代測序技術(shù)處于初步發(fā)展階段,仍有待創(chuàng)新和完善。
參考文獻:Progress in chemistry,2016,28(1);58-66